[화장품_균 연구] Gram Staining (Differential stain)

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[실험방법]

 

그람 양성균과 그람 음성균의 색깔 변화

 

 

1) 세균을 채취하여 슬라이드에 도말함

(고체배지의 경우 면봉을 증류수에 묻혀 살짝 말린 후 도말 후 고체배지의 colony를 묻혀 도말함)

고체배지 colony를 도말하였음 (도말 후 건조시킨 상태임)

 └ 도말한 균 : P.acne (여드름 균) - 그람 양성균

 

 

2) 알코올 램프에 Fixation -> 건조함

조심스럽게 왔다 갔다 하면서 건조를 시킨다.

 

 

3) Crystal Violet 처치 (염색 1단계) 후 1분 방치

crystal violet 염색 후

 

 

4) 슬라이드 글라스에 도말한 균이 조심스럽게 씻겨 내려가지 않도록 증류수로 washing

 

 

5) 물기를 어느 정도 제거한 후 알코올 램프에 Fixation -> 건조함

건조 건조

 

 

6) iodine 용액을 처치 (매염 - 2단계) 후 1분 방치

2단계 염색

 

 

7) 증류수로 washing & 물기 제거 + 탈색 용액 (EtOH 95% + Acetone 각각 1:1) 처치 (3단계) 후 1분 방치

 

3단계 - 탈색

 

 

8) 증류수로 washing & 물기 제거 + 대조 염색 (Safranin, 4단계) 처치 후 1분 방치

 

4단계 - 대조염색

 

 

9) 육안으로 색 관찰 (그람 양성균 & 그람 음성균 분류) 후 현미경으로 확인