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[화장품_효능 연구] Reducing Power Assay (환원력 실험)

* Master hee 뚝딱뚝딱 화장품 채널 * [서설] 해당 실험 또한 H2O2 실험과 마찬가지로 간단한 실험이지만 손이 많이 가는 실험이라 시료가 많을 시 실험 스케줄을 넉넉하게 잡고 진행할 필요가 있다. 또한 96 well plate, Test tube만을 사용했던 실험과는 달리 ep tube와 96 well plate를 같이 사용한다. [실험 목적] 1. 산화되어 생기는 손상으로부터 시료(샘플)가 얼마나 보호할 수 있는지 알아보는 실험. 2. 시료(샘플)의 환원력을 알아보는 실험. → Potassium Ferricyanide는 환원되어 Ferrocyanide로 변함. / 산화제인 Potassium Ferricyanide는 항산화능이 좋은 물질과 반응하면 환원됨. [필요 시약] 1) NaH2PO4 ..

[화장품_효능 연구] Hydrogen Peroxide Scavenging assay (H2O2) (활성산소 억제 실험)

* Master hee 뚝딱뚝딱 화장품 채널 * [서설] H2O2 실험은 다른 실험에 비해 매우 간단한 실험이라 실패 확률이 낮은 실험이다. 그 전 실험들은 96well Plate를 사용하였지만 해당 실험은 Test tube를 사용한다. [실험 목적] 1. 시료의 활성산소 (과산화수소) 억제력을 확인하는 실험. [필요 시약] 1) Hydrogen peroxide - 40mM (in PBS) - MW : 34.0147 g/mol / 순도 : 99.9 - store at : 냉장보관 2) PBS (Phosphate Buffer Saline, 인산완충식염수) 3) Positive control - Ascorbic acid (Vitamin C) in EtOH / D.I.W - store at : 실온보관 [실험..

[화장품_효능 연구] Superoxide Dismutase like activity assay (SOD 유사 활성 실험)

* Master hee 뚝딱뚝딱 화장품 채널 * [Pyrogallol] - 물에 녹았을 때 ROS를 생성하는 물질임. - 벤젠에 수산기가 3개 붙은 폴리페놀로서, C6H3(OH)3의 화학식을 갖음. - Pyrogallol은 본래 투명색이지만, 공기나 *알칼리성 용액 중에서 쉽게 산화되기 때문에 (공기 중의 산소를 흡수하여 흑갈색으로 변색됨) 과산화수소로 전환시키는 반응을 촉매하는 pyrogallol의 생성량을 측정하여 SOD 유사활성을 지닌 소재를 탐색하고자 하는 실험임. * 알칼리성 용액 : 본 실험에서 0.05M Tris-HCl buffer 사용, Tris는 주로 약알칼리에서 buffering을 하는 염기(base)성 버퍼임. (출처 : biotechnology.tistory.com/182) - Py..

[화장품_효능 연구] Superoxide Dismutase like activity assay (SOD 유사 활성 실험)

* Master hee 뚝딱뚝딱 화장품 채널 * [실험 목적] 1. 물질의 항산화력을 측정하기 위함. 2. Pyrogallol이 만들어내는 활성산소종을 없앨 수 있는 항산화 효소가 얼마나 있는지 측정하는 실험임. → 과산화수소(H2O2)로 전환시키는 반응을 촉매하는 pyrogallol의 생성량을 측정함. (시료의 효능이 높을수록 pyrogallol 시약 색이 갈색으로 변하지 않음) [필요 시약] 1) Trizma base - MW : 121.14 g/mol / 순도 : 99.9 - store at : 실온보관 2) Hydrochloric acid (HCl) - store at : 실온 보관 3) Pyrogallol (substrate) - MW : 126.11 g/mol / 순도 : 98 - solven..