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* Master Hee 뚝딱뚝딱 화장품 채널 * * 세포 배양(Cell subculture)은 비단 화장품 효능 연구 뿐만 아니라 세포를 다루는 모든 실험의 기본이다. 부유세포 배양법 (floating cell subculture) - 부유세포는 floating cell 또는 suspension cell이라고 부름. - 증식하기 위해 표면에 부착할 필요가 없는 세포이며, 혈액에 존재하는 대부분의 면역 세포들이 속함. (출처 : Google) - 세균과 유사하게 계대 배양을 함. - 탈착 과정(trypsin 처리 등)을 필요로 하지 않으며 전체적으로 부착 세포보다 시간이 더 적게 소요되고, 세포를 유지하기 위해서는 주로 배양 세포를 희석시키거나 계대 배양 없이 단순히 media의 양을 증가시킴으로써 지속적..

* Master hee 뚝딱뚝딱 화장품 채널 * 세포 실험을 시작하기에 앞서 동결한 세포를 해동시켜야 한다. 해동시키는 작업은 간단하다. [준비물] 1. 10% Fetal Bovine Serum + 1% Penicillin이 들어간 DMEM(Dulbeco"s Modified Eagle"s Medium) 배지 2. 15mL Conical tube 3. 전동 pipette 4. Mess pipette 10mL 5. Petri dish 6. 37℃ waterbath 7. 37% + 5% CO2 incubator 8. Cell [순서 요약] _ 자세한 순서와 주의사항은 아래 사진과 첨부하였음. 세포 기준 - Raw 264.7 mouse macrophage Cell 1. 동결 보존된 바이알 (Stock vial)..

* Master hee 뚝딱뚝딱 화장품 채널 * [배지 조성] - 아미노산, 비타민, 무기염분, 포도당, 지질, 지시약 + 혈청 1. 아미노산 - L-(arginine, cysteine, glutamine, histidine, isoleucine, methionine, threonine, tryptophan, tyrosine, valine, leucine)과 glycine이 들어있음. - 이러한 아미노산들은 세포의 단백질 합성 원료로 이용되며 성장과 생장을 도움. - 아미노산들은 L형과 D형으로 나뉘는데, 그 중 동물세포에서 단백질 합성으로 이용할 수 있는 단백질은 'L형'으로, glycine을 제외하고는 모든 아미노산은 L형을 넣어주게 됨. - 조성에 들어가는 아미노산은 크게 필수 아미노산 9종류와 준..

* Master hee 뚝딱뚝딱 화장품 채널 * 세포 실험을 하기 위해서는 배양하는 배지를 조제해야 한다. 조제하는 법은 어렵지 않다. [준비물] 1. Fetal Bovine Serum 50mL (전체 배지 양의 10%) 2. Penicillin-Streptomycin 100X 5mL (전체 배지 양의 1%) 3. DMEM(Dulbeco"s Modified Eagle"s Medium) 배지 (500mL) → 가장 일반적으로 동물 세포 배양에 사용되는 Media [순서] 1. DMEM 배지, FBS, Penicillin을 37℃ waterbath에 담가 둔다. (~30 min) 2. DMEM 배지에 FBS 50mL을 넣는다. (본 연구실에서는 미리 소분을 해 둔다.) 3. Penicillin 5mL을 넣는..