연구노트/생리활성 실험

[화장품_효능 연구] ABTS+ radical scavenging ability assay 실험 순서

낭희제 2020. 10. 23. 10:23
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[실험 순서]

1. sample(타겟 시료)과 positive control를 농도별로 조제한다.

 

sample 계량 완료
sample 용해 완료
sample 농도 희석 완료

 

2. 96 well plate를 준비한다.

3. control 칸과 control blank 칸에 sample 용매와 positive control 용매를 100㎕ 씩 처치한다.

4. sample 칸 sample blank 칸에 농도별로 조제한 sample과 positive control을 100㎕ 씩 처치한다.

 

sample 처치

5. ABTS 용액의 용매 D.I.W를 control blank 칸과 sample blank 칸에 100 ㎕ 씩 처치한다.

6. 조제한 ABTS 용액을 control 칸과 sample 칸에 100 ㎕ 씩 처치한다.

7. 실온에서 차광하여 1분 반응 후 734nm에서 ELISA로 측정한다.

8. 반응 시간이 짧으므로 sample의 양이 많을 경우 1번부터 5번미리 진행한 후 6번부터 7번까지 유동적으로 시간 텀을 두면서 실험을 진행하면 된다.

※ 거품 안 생기게 피펫팅 할 것.

9. 결과 확인 (육안으로도 쉽게 알 수 있음)

 

결과 확인 - sample의 농도가 높을수록 시약 고유의 색 청록색이 탈색된 것을 확인하였다.
탈색된 모습 가까이서 확인

 

+) 실험 과정 동영상

 

ABTS 과정

 

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