Master HEE

* Master hee 뚝딱뚝딱 화장품 채널 * [서설] 화장품약리학과에 입학한 후 학부생 연구원으로 시작했을 당시 가장 처음 배웠던 실험이 EDA (DPPH) 실험이다. 이 실험에 대해 정리를 할 때면 항상 그 시절 처음 배웠던 기억이 나서 제대로 정리하고 싶은 생각이 든다. 당연한 소리겠지만 실험을 시작하기 전에 이 실험을 왜 하는지, 이 실험은 어떤 원리로 이루어져 있는지를 파악하고 나니 이해가 더 잘 되어 실험도 잘 되는 느낌이었다. 그럼 시작! [실험 목적] 1. 물질의 항산화력을 측정하기 위함. 2. 천연물의 DPPH에 달린 Free radical의 환원력을 알아보기 위함. [DPPH 시약의 구조] - DPPH는 화학적으로 안정화된 Free radical을 가지고 있는 수용성 물질 - 515-..

* Master hee 뚝딱뚝딱 화장품 채널 * 세포 실험을 시작하기에 앞서 동결한 세포를 해동시켜야 한다. 해동시키는 작업은 간단하다. [준비물] 1. 10% Fetal Bovine Serum + 1% Penicillin이 들어간 DMEM(Dulbeco"s Modified Eagle"s Medium) 배지 2. 15mL Conical tube 3. 전동 pipette 4. Mess pipette 10mL 5. Petri dish 6. 37℃ waterbath 7. 37% + 5% CO2 incubator 8. Cell [순서 요약] _ 자세한 순서와 주의사항은 아래 사진과 첨부하였음. 세포 기준 - Raw 264.7 mouse macrophage Cell 1. 동결 보존된 바이알 (Stock vial)..

* Master hee 뚝딱뚝딱 화장품 채널 * [배지 조성] - 아미노산, 비타민, 무기염분, 포도당, 지질, 지시약 + 혈청 1. 아미노산 - L-(arginine, cysteine, glutamine, histidine, isoleucine, methionine, threonine, tryptophan, tyrosine, valine, leucine)과 glycine이 들어있음. - 이러한 아미노산들은 세포의 단백질 합성 원료로 이용되며 성장과 생장을 도움. - 아미노산들은 L형과 D형으로 나뉘는데, 그 중 동물세포에서 단백질 합성으로 이용할 수 있는 단백질은 'L형'으로, glycine을 제외하고는 모든 아미노산은 L형을 넣어주게 됨. - 조성에 들어가는 아미노산은 크게 필수 아미노산 9종류와 준..

* Master hee 뚝딱뚝딱 화장품 채널 * 세포 실험을 하기 위해서는 배양하는 배지를 조제해야 한다. 조제하는 법은 어렵지 않다. [준비물] 1. Fetal Bovine Serum 50mL (전체 배지 양의 10%) 2. Penicillin-Streptomycin 100X 5mL (전체 배지 양의 1%) 3. DMEM(Dulbeco"s Modified Eagle"s Medium) 배지 (500mL) → 가장 일반적으로 동물 세포 배양에 사용되는 Media [순서] 1. DMEM 배지, FBS, Penicillin을 37℃ waterbath에 담가 둔다. (~30 min) 2. DMEM 배지에 FBS 50mL을 넣는다. (본 연구실에서는 미리 소분을 해 둔다.) 3. Penicillin 5mL을 넣는..